-  Le test Pisum  -

© Armand LE VIOL

Ce test à été réalisé la première fois sur le pois d'où son nom. En classe, il est plus facile de le réaliser sur des hypocotyles de soja, de croissance plus rapide ayant un hypocotyle bien droit. Il a pour objectif de préciser comment agit l'auxine sur les cellules cibles
1. Protocole expérimental :
  • Mettre à tremper des graines de soja pendant 24 heures dans de l'eau.
  • Disposer ces graines ensuite dans un bac avec sur le fond deux à trois couches de papier ménage.
  • Bien humecter mais ne pas noyer les graines.
  • Éclairer les germinations avec une lampe disposée verticalement au dessus les cultures.

Les photos ci-dessous montre les germinations à deux et à cinq jours.

germinations de deux jours
germinations de cinq jours

Après cinq jours de culture, récolter 42 hypocotyles de 3 cm de longueur, en fendre 30 dans la partie supérieure sur 1,5 cm.
Disposer dans 6 boîtes de Pétri contenant 10 ml de solution d'AIA (acide indoly-acétique) à une concentration de 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 millimoles / L et 10 ml d'eau.
2.  Acquisition des résultats :
 Disposer les 6 boîtes sur un scanner. 
Réaliser une scannérisation toutes les heures. Pour cela il est possible de déclencher le scanner automatiquement à l'aide du logiciel "SERISCAN"  téléchargeable sur le site de l'académie d'Amiens (http://www.ac-amiens.fr/svt/outiprat/seriscan/index.htm)

Voici l'image obtenue au bout de 20 heures dans les boîtes de Pétri :
III) Traitement des résultats :
 Il est possible de réaliser seulement l'observation des courbures, mais une méthode plus précise consiste à mesurer l'angle de courbure des deux branches du Y . Voici un exemple montrant comment tracer ces angles sur une boîte de Pétri.

Pour avoir des valeurs significatives un calcul de moyenne est nécessaire.
Dans ces expériences une concentration d'hormone à 10-4 milli moles/L semble la plus rapidement efficace ( 5 heures ) pour obtenir une courbure significative redressant les branches du Y. L'hormone provoque donc une élongation des cellules périphériques.

Origine : FRANCE - Académie de Rennes - site SVT - http://www.ac-rennes.fr/pedagogie/svt